一．产品简介

CTCC自主研发的成软骨诱导分化培养基（货号：CTCC-Y002），体外诱导MSCs向软骨细胞分化。该培养基包括促进MSCs向软骨分化的基础培养基，优质质量胎牛血清，所需的培养基添加物以及青链霉素。

二．包装组成成分

三．成软骨诱导分化操作规程：

1. 分离原代MSCs后，置于37℃，5%CO₂培养箱中培养，每2-3天换液或传代。

2. 建议使用低代次的MSCs（<8代，MSCs随着传代后代次的增加，多向潜能也逐渐降低）。细胞均匀分布，融合度达到80%时，用0.25%Trypsin-EDTA消化传代。

3. 收集细胞，按照5X10⁵cells/ml密度用37℃预热的软骨诱导培养基重悬，吸取0.5ml细胞悬液转移至15ml聚丙烯离心管中。

4. 将15ml离心管1500rpm离心5min，其目的将细胞离心至底部。拧松管盖，静置于37℃，5%CO₂培养箱中进行培养。

5. 培养24h-48h后观察细胞是否出现聚团现象，如有出现，轻弹管底使软骨球脱离管底悬浮培养。

6. 每隔2-3天进行换液，软骨诱导培养需要37℃预热，换液体积为0.5ml（换液需小心避开软骨球）。

7. 换液后轻弹管底，悬起软骨球，继续拧松管盖，37℃，5%CO₂培养箱中正常培养。

培养28天左右，取出软骨球，进行固定、包埋、切片和甲苯胺蓝染色。