一．产品简介

CTCC自主研发的原代破骨诱导分化培养基（货号：CTCC-Y004），体外诱导原代骨髓单核细胞（BMMs）向破骨方向分化。该培养基包括促进原代骨髓单核细胞向破骨方向分化的基础培养基，优质胎牛血清，细胞因子以及青链霉素。

二．包装组成成分

三．骨髓单核细胞的分离操作规程：

1. 麻醉动物：向实验动物腹部注射麻醉剂和肝素（防止血液凝固，便于分离更加纯净的破骨前体细胞）。

2. 取腿骨：在超净台中取出ICR小鼠双侧股骨和胫骨，置于盛有PBS的10cm细胞培养皿中，尽量剔除腿骨外侧肌肉。

3. 获取髓系细胞：将腿骨放置于盛有适量α-MEM完全培养基的新的培养皿中，用剪刀剪掉股骨胫骨两端(股骨中骨髓较多，暴露即可，尽可能少剪一点)，用无菌注射器，吸取1mL完全培养基，对准插入到骨髓腔中，冲出骨髓，反复操作至骨髓腔发白。收集吹打下来的细胞，1000rpm，离心10min，弃上清。

4. 接种细胞：吸取10mL α-MEM完全培养基重悬细胞，接种于10cm皿中，于37℃，5%CO₂培养箱静置培养。

5. 收获单核巨噬细胞：24h后，侧倾培养皿，轻柔吸取全部上清液至离心管中，1200rpm离心10min，弃上清。细胞沉淀即含有单核巨噬细胞，可用于破骨诱导实验。