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一.产品简介
CTCC自主研发的Raw264.7细胞破骨诱导分化培养基(货号:CTCC-Y005),体外诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7向破骨方向分化。该培养基包括促进RAW264.7细胞向破骨方向分化的基础培养基,优质胎牛血清,细胞因子以及青链霉素。
二.包装组成成分
培养基名称 | 规格 | 保存方式 | 有效期 |
Raw264.7细胞破骨诱导培养基 | 100ml | 避光,4℃ | 1个月 |
三.破骨诱导分化操作规程:
1. 小鼠的单核/巨噬细胞系RAW264.7用含10%FBS的DMEM 高糖培养基于37℃,5% CO2培养,其中含1%青链霉素。
2. 使用37℃预热的破骨诱导分化培养基重悬细胞,按照5000~20000 cells/cm2密度进行铺板,48孔板培养基体积建议400-500μL。
3. 细胞每隔1d全量换液一次,每次换液前破骨诱导分化培养基应37℃预热。
4. 诱导分化4-10天,可观察到成熟的多核破骨细胞。
注意:
l RAW264.7细胞分化程度过高,即未诱导时伸出伪足的细胞比例过高
l 接种密度不恰当
l 长时间在培养箱外观察
l 实验时诱导分化培养基未预热
l 换液未按照上述规程操作
l 诱导分化培养基保存失当,反复温浴和冷藏交替
以上情况都会造成破骨诱导不成功或者破骨分化效率低